иммунофенотипирование костного мозга для чего делают

Иммунофенотипирование костного мозга для чего делают

Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD56). Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, субпопуляции лимфоцитов.

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:

— но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

С инфекционным синдромом:

С аллергическим (атопическим) синдромом:

С аутоиммунным синдромом:

С иммунопролиферативным синдромом:

Что означают результаты?

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов

Повышение показателя

Снижение показателя

Т-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD8 + CD45 + )

Т-«натуральные киллеры», НК-Т

Не имеет диагнос­тического значения.

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.

Источник

Иммунофенотипирование костного мозга для чего делают

Лаборатория иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга

Заведующий лабораторией — Гальцева Ирина Владимировна (на фото справа).

Лаборатория была организована 1 марта 2013 г.

Иммунофенотипирование клеток, осуществляемое с помощью проточной цитофлуориметрии, широко применяется в клинико-диагностических и научных исследованиях. Отличительной чертой данного анализа является возможность определения фенотипа единичных клеток. Метод основан на применении моноклональных антител к антигенам дифференцировки, сочетание которых позволяет выявлять разнообразные клеточные популяции. Совокупность антигенов на поверхности клетки называется иммунофенотипом. Проточная цитофлуориметрия за последние 20 лет стала неотъемлемым исследованием в диагностике различных гематологических заболеваний, в частности лимфом, лейкозов, плазмоклеточных неопластических заболеваний, пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ) и др. На основании данных об иммунофенотипе и анализе большого количества клеток проточная цитофлуориметрия позволяет находить крайне редко встречающиеся клеточные субпопуляции.

Коллектив лаборатории. Гальцева Ирина Владимировна (сидит) — заведующий лабораторией. Стоят: Капранов Н. М., Давыдова Ю. О.

Сотрудники лаборатории являются высококвалифицированными специалистами в области проточной цитофлуориметрии, прошли обучение не только в клинических центрах России, но и в зарубежных университетах и имеют сертификаты по основам проточной цитометрии. Прошли обучение в международной школе цитометрии в г. Женева (Швейцария) и получили сертификат, подтверждающий адекватность анализа и разрешающий проводить исследование ПНГ-клона (Россия, Америка). Также получили практический опыт работы по диагностике и анализу острых лейкозов и лимфом в Гентском университете в Бельгии. Сотрудники лаборатории регулярно посещают международные конференции и обмениваются знаниями с зарубежными и российскими коллегами.

Лаборатория тесно сотрудничает с научно-клиническими подразделениями НМИЦ гематологии. Основным направлением работы лаборатории является стандартизация и применение метода проточной цитофлуориметрии для диагностики минимальной остаточной болезни (МОБ) при таких заболеваниях, как множественная миелома, острые лимфобластные и миелобластные лейкозы.

В лаборатории осуществляют подсчёт гемопоэтических CD34-позитивных стволовых клеток на рутинной основе в образцах периферической крови, костного мозга и продуктах лейкоцитафереза согласно международному протоколу ISHAGE (International Society of Hematotherapy and Graft Engineering).

Врач КЛД Давыдова Юлия Олеговна.

Диагностика плазмоклеточных неоплазий и поиск МОБ при множественной миеломе проводится согласно последним мировым рекомендациям по стандартизации исследований, опубликованным в 2016 году (Stetler—Stevenson, Paiva, Rawstron). Мониторинг МОБ при острых В- и Т-линейных лимфобластных лейкозах проводится в рамках протоколов ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2016. Проводится оптимизация и отработка методики поиска МОБ при острых миелобластных лейкозах. Впервые в России в лаборатории начато применение и интеграция иммунофенотипического исследования в схему диагностики миелодиспластических синдромов. Данный анализ проводится в соответствии с европейскими рекомендациями сообщества LeukemiaNet.

Медицинский физик Капранов Николай Михайлович.

В лаборатории проводятся многочисленные исследования, которые ложатся в основу диссертационных работ врачей-гематологов и трансфузиологов. С участием сотрудников лаборатории опубликовано большое количество печатных работ и стендовые доклады на международных симпозиумах. В сферу научных интересов входят исследования субпопуляционого состава крови и костного мозга у больных после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, в частности Т-регуляторных клеток; изучение циркулирующих эндотелиальных клеток у больных после трансплантации; исследование экспрессии ангиотензин-превращающего фермента на мобилизованных стволовых клетках крови; изучение динамики ПНГ-клона у больных апластической анемией; проводится изучение элементов иммунологического синапса при лимфомах; фиксированных антитромбоцитарных антител у больных с множественными трансфузиями. На базе лаборатории проведено исследование активационных маркеров тромбоцитов в заготовленных при различных условиях тромбоконцентратах доноров, оценивается динамика изменения количества циркулирующих CD34+ клеток в периферической крови у пациентов после проведения спленэктомии, оцениваются различные свойства мультипотентных мезенхимных стромальных клеток, использующихся для профилактики реакции трансплантат против хозяина после трансплантации аллогенных стволовых клеток, оценивается динамика изменения субпопуляционного состава лимфоцитов крови у больных острыми В-лимфобластными лейкозами, получающих таргетную терапию и пациентов после выполнения трансплантации аллогенной почки.

Ключевые сотрудники

Давыдова Юлия Олеговна — врач клинической лабораторной диагностики.

Капранов Николай Михайлович — медицинский физик.

Источник

Лабораторная диагностика

Для диагностики заболеваний системы крови используется широкий спектр лабораторных исследований. Для большинства патологий достаточно выполнения 3-х исследований:

1. Одним из эффективнейших «скрининговых» методов диагностики в гематологии является клинический или общий анализ крови (ОАК). Применение высокотехнологичных автоматических гематологических проточных анализаторов, выполняющих исследование более чем 10000 клеток в одном образце, позволяет повысить точность, воспроизводимость и диагностическую значимость данного анализа.

2. Цитологическое исследование костномозговых элементов. Костный мозг получают посредством проведения аспирационной биопсии в области грудины или подвздошной кости. Миелограмма позволяет судить о клеточности костного мозга, пролиферативной активности, дифференцировке и лейкоэритробластическом соотношении, а также о морфологии гемопоэтических клеток. Выявленные изменения гемопоэза могут носить опухолевый и функциональный (реактивный) характер.

Дополнительные методы исследования.

В целом ряде случаев для подтверждения варианта того или иного заболевания системы крови необходимо проведение дополнительных высокотехнологичных исследований:

1. Иммунофенотипирование клеток крови и костного мозга

Иммунофенотипирование клеток – это определение кластеров дифференцировки (англ. cluster of differentiatio, сокращенно CD) на поверхности клеток крови и, соответственно, принадлежности клеток к той или иной субпопуляции (например, Т-хелперы CD45+,CD3+, CD4+). В настоящее время данное исследование осуществляется на проточных цитофлюориметрах. Так, например, иммунофенотипирование лимфобластов имеет большое значение в диагностике острых лимфолейкозов и позволяет делать заключение о прогнозе и наиболее подходящей схеме лечения. В зависимости от экспрессируемых дифференцировочных маркеров, В-лимфобласты разделяются на ранние про-В-, поздние про-В- и пре-В-лимфобласты. Ранние про-В-клетки экспрессируют CD19, CD34 и цитоплазматический CD22. Поздние про-В-клетки характеризуются присутствием терминальной деоксинуклеотидилтрансферазы, CD10, CD79a и, в ряде случаев, CD20 и поверхностного CD22. Отличительной особенностью пре-В-клеток является присутствие в цитоплазме тяжёлых цепей иммуноглобулинов класса μ. Острые Т-клеточные лимфобластные лейкозы делят на 5 иммунофенотипов: про-Т-, пре-Т-, кортикальные Т-, зрелые αβ или γδ Т-клеточные ОЛЛ. Клетки всех пяти иммунофенотипов экспрессируют цитоплазматический CD3. Про-Т-лимфобласты отличаются присутствием CD7, пре-Т-лимфобласты — CD2 и/или CD5. Кортикальные Т-клетки, в отличие от всех остальных, синтезируют CD1a. Зрелые Т-клеточные ОЛЛ классифицируют в зависимости от того, какой вариант Т-клеточного рецептора они несут на своей мембране

2. Цитогенетические исследования и молекулярно-генетические исследования

Цитогенетическое исследование применяется для оценки количества и структуры хромосом. Например, цитогенетическая диагностика хронического миелоидного лейкоза основана на обнаружении так называемой филадельфийской хромосомы (Ph’) – результата перестройки хромосом из 9-й и 22-й пар, то есть транслокации t(9;22). Существуют разные методы цитогенетического анализа – например, широко известен метод флуоресцентной гибридизации in situ (Fluorescent in situ Hybridization, FISH). Высокочувствительный молекулярно-генетический анализ применяется для более точной диагностики многих заболеваний, но и для многих других целей: например, для контроля минимальной остаточной болезни и максимально раннего обнаружения рецидива лейкоза, когда немногочисленные лейкемические клетки еще нельзя обнаружить стандартными методами. Например, основным методом молекулярной диагностики и молекулярного мониторинга хронического миелолейкоза является количественное определение экспрессии химерного онкогена BCR-ABL методом ПЦР в реальном времени. Молекулярный мониторинг BCR-ABL приобрел важнейшее значение с появлением лекарств – ингибиторов тирозинкиназ, первым из которых явился иматиниб, поскольку при этой терапии у пациентов достаточно быстро достигается полный цитогенетический ответ, и дальнейшее отслеживание динамики опухолевого клона цитогенетическими методами становится невозможным.

В связи с многообразными проявлениями заболеваний системы крови для дополнительной диагностики используются и другие методы:

Цитохимическое исследование костного мозга. В настоящее время цитохимические методы диагностики используются для оценки направленности дифференцировки клеток и основана на изучении ферментативной активности (миелопероксидаза, PAS реакция, неспецифические эстеразы, фосфатазы) и содержания различных маркеров (липиды, негемоглобиновое железо) в клетках крови, костного мозга, лимфоузлов.

Выявление, иммунохимическая характеристика и количественная оценка парапротеинов в сыворотке и моче, включая выявление и количественное определение белка Бенс-Джонса в сыворотке.

Количественное определение прогностических показателей в дебюте секреции и в динамике – по назначению клинициста (СРБ, бета 2-микроглобулин);

Оценка вторичных изменений (иммунодефицит и другие вторичные гаммапатии, воспаление, наличие и тип патологической протеинурии), определение активности РФ по результатам скрининга.

Источник

Анализ клеток крови и головного мозга на иммунофенотипирование (ИФТ)

Исследование крови и костного мозга на иммунофенотипирование – один из наиболее точных методов диагностики, с помощью которого обнаруживают и квалифицируют различные заболевания, подтверждают диагноз. Также данный способ позволяет определить наиболее удачную схему лечения.

Прайс

Иммунофенотипирование костного мозга и лимфоцитов периферической крови проводится в Москве по доступной цене высококвалифицированными сотрудниками ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР»: профессором, доктором медицинских наук Луговским С. А., доцентом, кандидатом медицинских наук Почтарь М. Е., доцентом, кандидатом медицинских наук Наумовой Е. В.

Какой биоматериал используется для анализа ИФТ?

В зависимости от задач исследования, материалом для анализа может служить:

Суть исследования заключается в том, что при его проведении определяются типы клеток. С помощью особого оборудования или люминесцентных микроскопов, легко распознать принадлежность каждой из этих клеток к тому или иному виду и выявить возможные поражения.

Как подготовиться к процедуре?

Забор биоматериала производится в утренние часы натощак. Перед проведением исследования необходим период голодания, желательно, более 8 часов. Можно выпить небольшое количество воды. За несколько дней до процедуры недопустимо употребление алкоголя, курение сигарет, активные занятия спортом. На искажение результатов анализа крови ИФТ влияют тяжелые психоэмоциональные состояния.

Показания для проведения исследования

Как и любой анализ крови, фенотипирование проводится по ряду причин.

Обратите внимание, что интерпретировать результаты ИФТ костного мозга и лимфоцитов периферической крови нельзя самостоятельно и тем более, заниматься самолечением. Поставить точный диагноз может только врач-иммунолог, используя также результаты других анализов и обследований. Нормы показателей отличаются в зависимости от пола и возраста пациента.

В нашем медицинском центре в Москве есть все необходимые условия для качественной диагностики – врачи с многолетним опытом, современное оборудование, дружелюбный сервис и доступные цены на услуги. С помощью анализа на ИФТ легко предотвратить серьезную болезнь или обнаружить едва начавшиеся патологические процессы. Позаботьтесь о своем здоровье уже сегодня!

Источник