иммунофенотипирование лимфоцитов что это такое

Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) — CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56

Описание исследования

Данный тест предназначен для иммунофенотипирования (оценки клеточного состава) лимфоцитов крови человека с целью определения его иммунного статуса – комплексного показателя работы иммунной системы. В качестве зондов используются моноклональные антитела, позволяющие охарактеризовать тип и функциональное состояние клеток по определенным наборам клеточных маркеров дифференциации (CD-антигенам).

Представители каждой субпопуляции лейкоцитов на разных стадиях содержат поверхностные и цитоплазматические антигены, характерные только для определенного вида и периода развития. Другими словами, CD-антигены – это антигены на поверхности клеток, по которым одни типы клеток отличаются от других. Существует стандартизация и дифференциация CD-антигенов, им присвоены определенные номера. Исследование проводится посредством метода проточной цитометрии. Он основан на выявлении фотометрических и флюоресцентных изменений отдельных клеток, проходящих вместе с жидкостью через луч монохоматического света. Метод позволяет с помощью флюоресцентно-меченых моноклональных антител посчитать количество лимфоцитов, относящихся к различным субтипам или находящихся на разных стадиях развития.

В рамках теста определяются следующие показатели:

Характеристика основных подтипов лейкоцитов, исследуемых в тесте:

1. Т-лимфоциты. Созревание клеток происходит в тимусе (вилочковой железе – важном органе иммунной системы, расположенном в верхнем отделе грудной клетки), откуда и пошло их название. В их задачу входит контроль работы В-лимфоцитов, отвечающих за гуморальный ответ иммунной системы – продукцию антител.

Т-хелперы – подвид Т-лимфоцитов. Поверхность данных клеток содержит структуры, способные распознавать антигены, обнаруженные вспомогательными клетками. Также они принимают участие в регуляции иммунного ответа посредством продукции цитокинов (небольших информационных молекул).

Роль цитотоксических Т-клеток состоит в распознавании фрагментов антигена на поверхности клетки-мишени, направлении своих гранул по направлению к обнаруженной мишени и высвобождении их содержимого при непосредственном контакте с ней.

2. В-лимфоциты. Вырабатываются данные клетки в лимфоидной системе (лимфоузлах и периферических органах). Поверхность этих клеток содержит антитела-рецепторы к антигенам. При контакте с антигенами происходит деление В-лимфоцитов и дифференциация их в вырабатывающие антитела плазматические клетки, которые обеспечивают гуморальный иммунитет.

3. ЕКК. Естественные (или натуральные) клетки-киллеры проявляют неиммунную цитотоксическую активность к неопластически измененным (опухолевым) клеткам-мишеням. ЕКК не относятся ни к моноцитам, ни к зрелымВ- или Т-лимфоцитам.

4. Т-ЕК проявляют естественную неиммунную киллерную активность и проявляют признаки Т-лимфоцитов.

Подготовка к исследованию

Кровь сдается строго натощак после воздержания от пищи в течение:

Можно пить негазированную воду. От употребления кофе, чая, соков следует воздержаться.

Забор крови не рекомендуется осуществлять после инструментального, ректального, мануального, рентгеновского, ультразвукового обследований, биопсии, кольпоскопии, гастроскопии, флюорографии, физиопроцедур, массажа, прочих диагностических и/или терапевтических манипуляций.

Показания к исследованию

а) при наличии затяжных, хронических, рецидивирующих инфекционных заболеваний:

b) при подозрении на приобретенный или обусловленный генетически иммунодефицит;

c) при аутоиммунных заболеваниях (характеризуются атакой иммунной системой на здоровые клетки собственного организма, что приводит к поражению здоровых тканей и развитию аутоиммунных воспалительных процессов):

d) при аллергических заболеваниях:

e) при подозрении на СПИД;

f) при онкологических заболеваниях иммунной системы:

g) с целью обследования лиц перед и после трансплантации органов;

h) перед сложными операциями;

i) при осложнениях в послеоперационный период;

j) для осуществления контроля лечения, проводимого с применением цитостатиков (противоопухолевых препаратов), иммунодепрессантов (препаратов, искусственно угнетающих иммунную систему), иммуномодуляторов (препаратов, способных менять в любую сторону ответ иммунной системы организма).

Интерпретация исследования

Абсолютное количество клеток различных подтипов лимфоцитов измеряется в клетках в микролитре (кл/мкл), относительное – в процентах (%).

Иммунорегуляторный индекс – относительный показатель, рассчитываемый как соотношение CD4+ клеток (Т-хелперов) к CD8+ клеткам (Т-цитотоксическим клеткам).

Причиной изменения в составе субпопуляций лимфоцитов могут быть различные патологии, в частности, осложнения после оперативного вмешательства, трансплантации органов, при иммунодефиците, инфекциях, онкологических, аллергических, аутоиммунных заболеваниях. В таблице ниже отражены клинические ситуации, которые могут стать причиной изменения субпопуляционного состава лимфоцитов:

Субпопуляция лимфоцитов

Показатель повышается:

Показатель понижается:

Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+)

Естественные киллеры (CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+)

Т-естественные киллеры (CD3+CD56+CD45+)

Диагностического значения не имеет.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже (референсные значения указаны в графе «Нормы интерпретации»):

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата исследования: хх.хх.хххх

Исследование

Результат

Нормы интерпретации

Примечание

[287] Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) — CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56

Дата выдачи (дата исследования): хх.хх.хххх

Источник

Иммунофенотипирование лимфоцитов что это такое

Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD56). Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, субпопуляции лимфоцитов.

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:

— но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

С инфекционным синдромом:

С аллергическим (атопическим) синдромом:

С аутоиммунным синдромом:

С иммунопролиферативным синдромом:

Что означают результаты?

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов

Повышение показателя

Снижение показателя

Т-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD8 + CD45 + )

Т-«натуральные киллеры», НК-Т

Не имеет диагнос­тического значения.

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.

Источник

Анализ клеток крови и головного мозга на иммунофенотипирование (ИФТ)

Исследование крови и костного мозга на иммунофенотипирование – один из наиболее точных методов диагностики, с помощью которого обнаруживают и квалифицируют различные заболевания, подтверждают диагноз. Также данный способ позволяет определить наиболее удачную схему лечения.

Прайс

Иммунофенотипирование костного мозга и лимфоцитов периферической крови проводится в Москве по доступной цене высококвалифицированными сотрудниками ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР»: профессором, доктором медицинских наук Луговским С. А., доцентом, кандидатом медицинских наук Почтарь М. Е., доцентом, кандидатом медицинских наук Наумовой Е. В.

Какой биоматериал используется для анализа ИФТ?

В зависимости от задач исследования, материалом для анализа может служить:

Суть исследования заключается в том, что при его проведении определяются типы клеток. С помощью особого оборудования или люминесцентных микроскопов, легко распознать принадлежность каждой из этих клеток к тому или иному виду и выявить возможные поражения.

Как подготовиться к процедуре?

Забор биоматериала производится в утренние часы натощак. Перед проведением исследования необходим период голодания, желательно, более 8 часов. Можно выпить небольшое количество воды. За несколько дней до процедуры недопустимо употребление алкоголя, курение сигарет, активные занятия спортом. На искажение результатов анализа крови ИФТ влияют тяжелые психоэмоциональные состояния.

Показания для проведения исследования

Как и любой анализ крови, фенотипирование проводится по ряду причин.

Обратите внимание, что интерпретировать результаты ИФТ костного мозга и лимфоцитов периферической крови нельзя самостоятельно и тем более, заниматься самолечением. Поставить точный диагноз может только врач-иммунолог, используя также результаты других анализов и обследований. Нормы показателей отличаются в зависимости от пола и возраста пациента.

В нашем медицинском центре в Москве есть все необходимые условия для качественной диагностики – врачи с многолетним опытом, современное оборудование, дружелюбный сервис и доступные цены на услуги. С помощью анализа на ИФТ легко предотвратить серьезную болезнь или обнаружить едва начавшиеся патологические процессы. Позаботьтесь о своем здоровье уже сегодня!

Источник

Оценка отдельных функций иммунной системы человека.

Приём и исследование биоматериала

Подробное описание исследования

В-клетки, субпопуляции лимфоцитов и их функции.

Лейкоциты или белые кровяные тельца обеспечивают иммунитет человека и включают в себя несколько групп, имеющих различные функции и строение. К одной из таких групп относятся В-лимфоциты (В-клетки). Они играют важную роль в иммунитете и их основные функции включают:

Как и патология других лейкоцитов, таких как Т-лимфоциты, Т-хелперы, моноциты и эозинофилы, дефицит В-клеток может быть врожденным или приобретенным и характеризуется снижением синтеза иммуноглобулинов (антител). Это состояние приводит к повышенной восприимчивости к инфекционным агентам (бактериальной, вирусной, грибковой природы).

Чаще всего страдает дыхательная система.

В-клетки крови образуются в костном мозге, а затем попадают в кровь и ткани. В ходе развития на их поверхности появляются СD-маркеры (CD-рецепторы). Они могут быть общими для разных популяций клеток или специфическими для определенной популяции. Их существует большое количество, и каждый выполняет свою функцию. В данном исследовании оценивается четыре вида клеток по трем маркерам (CD19, CD5, CD27):

Исследование и дальнейшая расшифровки анализа имеют огромное значение для определения и лечения заболеваний иммунной системы. Так, CD19+CD5+ содержат B1а клетки. Их предшественники ещё в эмбриональном периоде перемещаются в брюшную и плевральную полости, где существуют как самоподдерживающаяся популяция.

Развитие В1b-лимфоциты похоже, однако число этого фенотипа у взрослых может частично пополняться за счёт костного мозга. Эти клетки (В1а и В1b) обеспечивают быстрый ответ на проникающие в организм широко распространённые патогены, преимущественно бактерии. Многие В1-клетки продуцируют антитела, специфичные к аутоантигенам. CD5 также имеют тимоциты, все зрелые Т-лимфоциты.

CD19+CD5- содержатся на поверхности В2-клеток. Прежде чем стать полноценной защитой организма, этот тип лимфоцитов должен пройти длительный этап дифференцировки. Данные клетки отличаются большим количеством функций, огромным спектром продуцируемых иммуноглобулинов и составляют примерно 95% от всей популяции лимфоцитов.

CD19+CD5-CD27+ содержат В-клетки памяти. Они долго живут в крови человека. Благодаря им происходит быстрый ответ на уже «знакомую» организму инфекцию. При контакте с чужеродным агентом они устремляются в красный костный мозг, где превращаются в другие клетки и начинают активно с ним бороться. CD27 обнаруживается и у Т-лимфоцитов.

Фенотипирование лимфоцитов.

СD19+, CD19+CD5-CD27+, CD19+CD5-, CD19+CD5+ и структуры, на которых они содержатся, делают работу иммунной системы «слаженной», отражают состояние защиты человека от микроорганизмов, а их дисбаланс может быть проявлением различных патологий.

При анализе и оценке панели CD-рецепторов в лаборатории «гемотест» используется метод проточной цитометрии. Фенотипирование лимфоцитов позволяет провести разделение по каждому показателю входящему в исследование, улучшить диагностику заболеваний. Лечащий врач видит результат в абсолютном и относительном числе клеток, сравнивает полученные значения с нормой и проводит расшифровку исследования.

Источник

Иммунофенотипирование клеток периферической крови (Иммунограмма базовая)

Исследование Иммунограмма базовая включает в себя:
1.CD-типирование лимфоцитов периферической крови:CD3, CD3/4, CD3/8, CD19, CD16/56, CD3/16/56, CD3/HLA-DR;
2.Лейкоцитарно-Т-лимфоцитарный индекс;
3.Иммунорегуляторный индекс;
4.Общий анализ крови.

Общая информация об исследовании
В современном понимании иммунный статус человека – это совокупность лабораторных показателей, характеризующих количественную и функциональную активность клеток иммунной системы в данный момент времени. Оценка иммунного статуса проводится с помощью иммунологического лабораторного обследования – иммунограммы. Иммунограмма крови не отражает избирательно состояние патологически измененного органа или системы, но позволяет оценить иммунную систему в целом (суммарный эффект изменения активности иммунной системы в ответ на чужеродный антиген).

Определение клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлюориметрии.
Иммунофенотипирование – это характеристика клеток, полученная при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров. Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD-антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD-антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно меченные моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии рассчитать содержание лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.
В основе проточной цитофлюориметрии лежит фотометрическое и флюоресцентное измерение отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.
Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:
— Т-лимфоциты (CD3+CD19-),
— Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+),
— Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3+CD8+CD45+),
— истинные натуральные «киллеры» (NK-клетки) (CD3-CD56+CD45+),
— В-лимфоциты (CD19+CD3-),
но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:
— Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток (Т-NK-клетки) (CD3+CD56+CD45+),
— NK-клетки, экспрессирующие альфа-цепь антигена CD8 (CD3-СD8+CD45+),
— активированные В-лимфоциты (CD3-CD25+CD45+),
— активированные Т-лимфоциты (CD3+HLA-DR+CD45+) и активированные цитотоксические лимфоциты (CD8+HLA-DR+CD45+),
— В-лимфоциты и активированные NK-клетки (CD3-HLA-DR+CD45+),
— активированные Т-лимфоциты, экспрессирующие альфа-цепь рецептора ИЛ-2 (CD3+CD25+CD45+),
— регуляторные Т-хелперные клетки (CD4+CD25brightCD127negCD45+), выполняющие иммуносупрессорную функцию.

Такое всестороннее изучение клеточного состава лимфоцитов в совокупности с результатами других тестов, входящих в состав исследования, позволяет установить более тонкие механизмы иммунологических нарушений, уточнить степень и глубину поражения иммунной системы и подобрать препарат для последующей адекватной иммунокорректирующей терапии, оценить эффективность проводимого лечения, дать прогноз заболевания.

В состав иммунограммы также входит определение лейкоцитарно-Т-лимфоцитарного индекса и иммунорегуляторный индекса.
Лейкоцитарно-Т-лимфоцитарный индекс — отражает соотношение общего количества лейкоцитов к Т-лимфоцитарному клеточному звену. Является относительным показателем, носящим ориентировочное значение. Его небольшое повышение или понижение не имеет самостоятельного диагностическогог значения, т. к. отклонение индекса может отмечаться при нормальных, но близких к границам нормы показателям количества Т-лимфоцитов и/или лейкоцитов. Тем не менее, изменения в индексе заставляют клинициста заострить внимание на причинах отклонения указанного индекса.
Иммунорегуляторный индекс CD4/CD8 — как ясно из названия отражает соотношение CD4+ клеток (Т-хелперы) к CD8+ клеткам (Т-цитотоксические клетки). Является относительным показателем, носящим ориентировочное значение. Его небольшое повышение или понижение не имеет самостоятельного диагностического значения, т. к. отклонение при нормальных, но близких к границам нормы показателях количества CD4+ клеток и/или CD8+ клеток. Тем не менее, изменения в индексе заставляют клинициста заострить внимание на причинах отклонения указанного индекса.

Показания для назначения исследования:

Исследование рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.
1.С инфекционным синдромом:
— частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
— бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
— урогенитальные инфекции;
— грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
— рецидивирующий герпес различной локализации;
— гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
— длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
— генерализованные инфекции (сепсис, гнойные менингиты).
2.С аллергическим (атопическим) синдромом:
— атопический дерматит;
— нейродермит;
— экзема с инфекционным компонентом;
— тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.
3.С аутоиммунным синдромом:
— ревматоидный артрит;
— рассеянный склероз;
— диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
— аутоиммунный тиреоидит;
— неспецифический язвенный колит.
4.С иммунопролиферативным синдромом:
— опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Источник